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氯化氢酶的定性测定

打印  发布时间:2013-7-11 15:56:05

    实验中对于氯化氢的操作,需要严格控制用量以及操作规范,在过氯化氢酶定性实验中操作流程如下:

    1.取4支干净的试管,按a  b  c对照编号。放在试管架上备用。

    2.在A   B  C试管内分别加入 5ml、10ml、15ml的活性污泥混合液,再在A和B试管中分别加10 ml和5 ml蒸馏水。在对照管内加15 ml蒸馏水。

    3.在A   B   C  及对照管中分别加入O.2%的淀粉液若干滴(淀粉液的用量,在做预备实验时根据样品中淀粉酶含量多少而定),迅速摇匀并记下反应的初始时间。

    4.在上述4个管内分别加若干滴碘液(碘液用量在预备实验时酌定),迅速摇匀,这时各管均呈蓝色。

    5.观察结果。注意各管的变化,记下各管蓝色完全消失时的时间(即淀粉酶和淀粉反应完全的时间),并对结果进行分析。

    细菌淀粉酶在固体培养基中的扩散实验

    1.将肉膏胨淀粉琼脂培养基加热融化,待冷至45℃左右倒人无菌培养皿内(每皿约10 ml),共倒3个,静置待冷凝即成平板。

    2.在无菌操作条件下,用接种环分别挑取枯草杆菌、大肠杆菌和活性污泥各一环分别在3个平板上点种5个点。倒置于37℃恒温箱内培养24~48 h。

    3.观察结果,取出平板,分别在3个平板内菌落周围滴加碘液,观察菌落周围颜色的变化。若在菌落周围有一个无色的透明圈,说明该细菌产生淀粉酶并扩散到基质中去。若菌落周围仍为蓝色,说明该细菌不产生淀粉酶。

    氯化氢酶的定性测定

    1.将配备的枯草杆菌和大肠杆菌斜面各1支放在试管架上。

    2.用滴管吸取过氧化氢滴加入两管菌种斜面上,有气泡产生的为接触酶阳性(有过氧化氢酶);无气泡产生的为接触酶阴性(无过氯化氢酶)。

    我公司是以氯化氢为主要经营项目的高新技术企业,主要销售用于医药中间体、农药及精细化学品制造业的高纯度氯化氢气体。

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